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BUNSEN本生資訊|牛血清：快問(wèn)快答
市面上用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要分為幾類(lèi)?
目前市面上用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要分為四種類(lèi)型：胎牛血清(FBS)、新生牛血清(NBCS)、小牛血清(CS)成牛血清(ABS)，而胎牛血清因未接觸外界所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分相對(duì)較少，含胚胎發(fā)育必須生長(zhǎng)因子等。
血清名稱(chēng) 縮寫(xiě) 采集時(shí)間 采集方法
胎牛血清 FBS 在母牛懷孕 5~8 個(gè)月 胎牛心臟密閉穿刺采血獲取的血潔
新生牛血清 NBCS 出生 12~24 小時(shí)未進(jìn)食新生牛 靜脈采血，亦有頸動(dòng)脈采血
小牛血清 CS 出生后 2 周至1年內(nèi)的小牛 靜脈取血
成牛血清 ABS 成牛 收集全血分離得
如何在外觀上一眼區(qū)分血清好壞?
淡黃色，透明——2小時(shí)以?xún)?nèi)的國(guó)產(chǎn)新生牛血清，膽紅素含量較少;
金黃色，透明——產(chǎn)下較長(zhǎng)時(shí)間的新生牛血清，一般超過(guò)2小時(shí)了;
金黃色，不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清;
淡黃色，帶一點(diǎn)微紅，透明——等級(jí)最高的胎牛血清;
淡紅色，透明——普通的胎牛血清;
紅色偏深，透明——普通的胎牛血清，采血環(huán)節(jié)不夠嚴(yán)謹(jǐn);
紅色偏暗，透明——普通胎牛血清，保存不好，血紅蛋白氧化了;
紅色，不透明——小牛血清，透明度越差，牛齡越大。
正常情況下，融化后血清的外觀顏色應(yīng)該是?
血清為動(dòng)物來(lái)源，成分復(fù)雜，不同批次間會(huì)存在一些外觀上的差別。一般情況下，它們的顏色可能是金黃色、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間。
血清應(yīng)如何融解?
從冰箱中取出血清，放于2-8℃融化，融化過(guò)程中不時(shí)旋轉(zhuǎn)(swirling mix)混勻。充分融解后分裝或平衡到室溫后使用。
為什么有時(shí)血清中出現(xiàn)絮狀沉淀?是否需要去除?如何去除?
多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成，最常見(jiàn)的原因之一是融化過(guò)程中，脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量?？梢?00g離心5分鐘，取上清，然后過(guò)濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑，一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞，建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾而不是直接過(guò)濾血清。
為什么存放于冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?
在2-8°C條件下存放，血清中的多種蛋白或脂蛋白會(huì)形成肉眼可見(jiàn)的沉淀，如血纖蛋白(fibrin)，單體時(shí)處于溶解狀態(tài)，在凍融過(guò)程中會(huì)發(fā)生聚集，形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會(huì)影響血清的性能?？梢?00g離心5分鐘，取上清，然后過(guò)濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑，一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞，建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾而不是直接過(guò)濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象，建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱，避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長(zhǎng)時(shí)間放置。
如何應(yīng)對(duì)血清的批間差?
全球康血清產(chǎn)品通過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控盡可能縮小批間差，但由于血清本身的特點(diǎn)和來(lái)源，無(wú)法避免批間差?？蛻?hù)可以通過(guò)做預(yù)測(cè)試等方式，選擇可滿(mǎn)足要求的血清批次。
注：以上資料僅供參考，不同品牌產(chǎn)品可能存在設(shè)計(jì)差異，操作前建議參考說(shuō)明書(shū)?。
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